多肽类的纯化 Peptide drugs purification

多肽药物是一种可以用于疾病的预防、治疗和诊断的多肽类生物药物，多肽类药物主要包括多肽疫苗、抗肿瘤多肽、抗病毒多肽、多肽导向药物、细胞因子模拟肽、抗菌性活性肽、诊断用多肽以及其他药用小肽等。多肽药物与一般的有机小分子药物相比，具有生物活性强、用药剂量小、毒副作用低和疗效显著等突出特点，然而其半衰期一般较短、不稳定，在体内容易被快速降解。

与蛋白类大分子药物相比，除了多肽疫苗外，多肽类药物免疫原性相对较小，用药剂量少，单位活性更高，易于合成、改造和优化，产品纯度高，质量可控，能够迅速确定药用价值。

多肽药物其制备方法主要有化学多肽合成、分离纯化法和基因工程法等，其中化学多肽合成是多肽药物的主要制备方式。虽然多肽类药物可以通过从生物体内分离纯化获得，但是天然存在的多肽分子含量少，无法完全满足临床应用的需求。

化学多肽合成方法是通过氨基酸逐步缩合的化学反应来实现，主要有Boc合成法和Fmoc合成法，首先将目的肽第一个氨基酸的羧基以共价键的形式与固相载体相连，再以这一氨基酸的氨基为合成起点，经过脱去氨基保护基并同过量的活化的第二个氨基酸反应，接长肽链。重复（缩合→洗涤→去保护→中和及洗涤→下一轮缩合）操作，达到所要合成的肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即得所要的多肽。一般不同肽链的长度其特征波长吸收峰不一样，一般通过特征波长吸收来判断纯度。

多肽的纯化主要以色谱层析洗脱为主，配合滤膜和活性炭精制，一般活性炭用量非常少。

生物多肽即通过动植物提取蛋白后水解得到氨基酸，再进行脱水缩合，一般在蛋白酶解液这个阶段就会处理掉颜色，即与氨基酸的脱色工艺一致。